Análisis de la función de miembros de la familia Yap durante la gastrulación de teleósteos

Abstract

Yap y Taz son dos proteínas parálogas que pertenecen a una familia de activadores transcripcionales implicada en el correcto mantenimiento de tejidos adultos y en el proceso de embriogénesis, al coordinar procesos de proliferación, diferenciación celular y apoptosis mediante su unión en el núcleo a diversos factores de transcripción, fundamentalmente los pertenecientes a la familia Tead. Su actividad está controlada por tres mecanismos de regulación principales: la ruta Hippo, compuesta por una serie de kinasas que bloquean el ingreso de estos efectores al núcleo; la tensión morfogenética, que favorece el acceso de Yap y Taz al núcleo mediante un proceso estrictamente mecánico dependiente de la activación de integrinas y la polimerización de fibras de estrés; y la acción de kinasas de la familia Src/Yes (SFKs), que activan a estos parálogos mediante procesos de fosforilación dependientes e independientes de la ruta Hippo. El propósito principal de este trabajo consiste en describir la historia evolutiva de las proteínas de la familia Yap en vertebrados y analizar su papel morfogenético durante la gastrulación de teleósteos. El desarrollo de la presente tesis doctoral ha permitido demostrar la existencia de un tercer parálogo de la familia Yap, bautizado como Yap1b, que presenta una estructura divergente de Yap y Taz, con un dominio de activación transcripcional C-terminal que carece de residuos de tirosina y que por tanto escapa al control ejercido por kinasas SFK. El gen yap1b, que cuenta con una importante contribución materna pero cuyo nivel de expresión desciende súbitamente tras la activación del genoma cigótico, mantiene una relación epistásica negativa con el gen yap1, puesto que su mutación simultánea agrava el fenotipo de embriones mutantes yap1-/- en medaka. La combinación de experimentos de iDamID-seq, RNA-seq, inmunofluorescencia, hibridación in situ e imaging demuestra que Yap desempeña un papel destacado en el establecimiento de los ejes principales del embrión de medaka y en el proceso de convergencia-extensión de células precursoras durante la gastrulación al promover la expresión de genes implicados en procesos de adhesión y migración celular, fundamentalmente genes que codifican para proteínas de la familia CCN como ctgfa y cyr61.