Estudio de la activación del sistema CbrAB en Pseudomonas putida en respuesta a la limitación de carbono

Abstract

El presente estudio se ha realizado en Pseudomonas putida, ( Y-proteobacterias). Nos hemos centrado en el estudio del sistema de regulación CbrAB, enfocado al regulador de respuesta CbrB. Con la finalidad de identificar dianas de este sistema, se realizó un ensayo de ChIP-Seq, con las dianas identificadas se trató de identificar una secuencia de unión para CbrB a las regiones promotoras de las dianas que regula.CbrB es un regulador transcripcional, que permite la expresión de los genes que regula. Se identificó como diana la región promotora del operón PP2810-13, se realizó mutagénesis dirigida de dicho promotor para identificar la interacción con CbrB y la secuencia de unión. Pudimos determinar que los niveles de expresión de l operón PP2810-13 están regulados por CbrB, requiere el concurso de la proteína IHF y es dependiente de fuente de carbono. Con objeto de conocer más sobre el operón PP2810-13 se obtuvo un mutante de inserción en este promotor y fue sometido a una batería de pruebas para intentar dilucidar su función, tales como crecimiento en presencia de diferentes fuentes de carbono, antibióticos, metales pesados y solventes orgánicos. No pudimos identificar un fenotipo claro para dicho operón, se describió un aumento de producción de pioverdina (sideróforo) en ausencia de hierro frente a la estirpe salvaje, pudiendo estar implicado de alguna forma en el metabolismo del hierro.