Terapia celular de la diabetes mellitus : optimización de los procedimientos de diferenciación e inducción de tolerancia

Abstract

La Diabetes Mellitus es una enfermedad metabólica crónica caracterizada por la presencia de elevados niveles de glucosa en sangre, como consecuencia de un fallo en la producción de insulina por el páncreas y/o por la ineficacia de su uso por el organismo. El trasplante de páncreas, al igual que sucede en cualquier trasplante de órganos, está sometido a la escasez de donantes, y debido a la alta prevalencia de la diabetes a nivel mundial y la estimación de su incremento en los próximos años, este problema se ve agravado. Por ello, científicos de todo el mundo tratan de encontrar fuentes alternativas para la terapia de la diabetes, que puede ser enfocada desde dos perspectivas distintas. Por un lado, la sustitución de las células beta pancreáticas productora de insulina, ámbito en el cual las células madre (CM) han ganado terreno en las últimas décadas, gracias a su capacidad de proliferación y diferenciación hacia los distintos linajes. Y, por otro lado, la detección de la destrucción de las células beta mediante el control del sistema inmune. En este sentido, el papel de las células T reguladoras (Treg) parecen ser fundamental debido a su capacidad de mediar el balance entre la tolerancia y la autoinmunidad. Este trabajo se ha centrado en el estudio de la regulación del factor de transcripción Pdx1 en células madre embrionarias de ratón (CMEr), debido a su implicación en la embriogénesis y función pancreática. El estudio epigenético del promotor de Pdx1, así como el estudio de la regulación por distintos factores de transcripción, nos ha permitido desarrollar un protocolo de diferenciación de CMEr hacia células productoras de insulina. Este protocolo esta basado en la adición de pequeñas moléculas, y consigue la obtencion de células productoras de insulina maduras in vitro. Asimismo, este protocolo parece ser reproducible en células madre humanas, por lo que puede ser una alternativa o proporcionar complementariedad a los protocolos de diferenciación existentes, reduciendo de forma significativa su costo y complejidad. En este trabajo nos hemos centrado también en el estudio y caracterización de células Treg procedentes de sangre de cordón umbilical y sangre periférica de adulto, además de comparar dos técnicas de selección distintas. Este estudio ha revelado que existen diferencias significativas en función de la procedencia y técnica de aislamiento empleada, por lo que este análisis proporciona datos interesantes a tener en cuenta para el uso de las células Treg en terapia celular.