β-Naphtoflavone and Ethanol Induce Cytochrome P450 and Protect towards MPP+ Toxicity in Human Neuroblastoma SH-SY5Y Cells

Abstract

Las isoenzimas del citocromo P450 (CYP) varían su expresión dependiendo del área del cerebro, el tipo celular y la presencia de fármacos. Algunas isoformas están involucradas en la detoxificación y/o activación tóxica de xenobióticos en el sistema nervioso central. Sin embargo, su papel en el metabolismo cerebral y la neurodegeneración sigue siendo motivo de debate. Hemos estudiado la inducibilidad de las isoenzimas CYP en células de neuroblastoma humano SH-SY5Y, tratadas con β-naftoflavona (β-NF) o etanol (EtOH) como inductores, mediante qRT-PCR, Western blot (WB) y ensayos de actividad metabólica. Se utilizó inmunohistoquímica para localizar las isoformas en mitocondrias y/o retículo endoplásmico (RE). Se realizó un ensayo de tetrazolio (MTT) para estudiar el papel de las CYP durante la exposición a metilfenil piridina (MPP+). El EtOH incrementó los niveles de ARNm y proteína de CYP2D6 en un 73 % y 60 %, respectivamente. Tanto β-NF como EtOH aumentaron el ARNm de CYP2E1 (4 y 1,4 veces, respectivamente) y los niveles de proteína (64 % ambos). La desetilación de 7-etoxicumarina y la desmetilación dextrometorfano fueron mayores en las muestras tratadas que en los controles. Además, ambos tratamientos aumentaron la viabilidad celular en células tratadas con MPP+ en un 22 % y 18 %, respectivamente. Finalmente, CYP2D6 se localizó en mitocondrias y RE. Estos datos indican que las CYP son inducibles en células SH-SY5Y y resaltan este sistema in vitro para estudiar el papel de las CYP en la neurodegeneración.