Caracterización molecular y funcional del complejo PHF14 - HMG20A

Abstract

En esta tesis se ha demostrado por primera vez la interacción molecular entre las proteínas PHF14 y HMG20A, que había sido sugerida previamente mediante estudios masivos de proteómica. Además, se han caracterizado molecularmente los dominios implicados en la interacción y se ha estudiado la estabilidad del dímero. A continuación, se ha demostrado un papel de este complejo en la adquisición y el mantenimiento del fenotipo mesenquimal en el modelo celular mesenquimal de cáncer de mama triple negativo MDA-MB-231, y en la línea de epitelio mamario de ratón NMuMG. Durante la caracterización funcional del complejo se desveló que PHF14-HMG20A modulan la ruta Hippo, el regulador máster del desarrollo epitelial TP63, y la ruta del TGFß. Además, se ha demostrado que la depleción de PHF14 y HMG20A provoca una desregulación de la expresión de los complejos de polaridad celular, que son esenciales para el mantenimiento del fenotipo epitelial. Todos estos procesos están estrechamente relacionados con cáncer, por lo que también se ha realizado un estudio del efecto de PHF14 y HMG20A en distintos tipos de cáncer, y en concreto, en adenocarcinoma de colon. Con este análisis se ha determinado que PHF14 está sobreexpresado en múltiples tipos de tumores, y que altos niveles de ambas proteínas están relacionados con peor prognosis en pacientes de adenocarcinoma de colon, sarcoma y cáncer de páncreas. Se ha realizado un análisis de los niveles de mRNA de PHF14 y HMG20A de biopsias de tejido sano y tumoral de pacientes del Hospital Virgen del Rocío de Sevilla, que han revelado que los niveles de mRNA de PHF14 y HMG20A están correlacionados, y son más altos en tejido tumoral que en tejido sano. Finalmente, también se ha caracterizado la distribución genómica de ambos miembros del complejo observándose que localizan en regiones reguladoras activas del genoma tipo enhancers.